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主题:叶绿素论文写作 时间:2024-03-25

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摘 要:开展了不同时间、不同混合液提取西瓜叶绿素含量的试验.试验结果表明,在室温(23℃)下,不同时间、不同混合液表现出相同的趋势:50%丙酮+50%乙醇、50%丙酮+50%甲醇的混合液比同类加蒸馏水的提取效果要好,提取叶绿素的含量相对较多且时间较短,在波长663 nm及645 nm的最高值出现时间最早;而单一的80%丙酮+20%蒸馏水提取叶绿素最慢且含量最低,在波长663 nm及645 nm的最高值出现时间最晚.因此,在西瓜田间大量样本叶绿素含量测定时,可采用50%丙酮+50%乙醇提取.

关键词:西瓜;叶绿素;浸提;混合液

中图分类号:S651 文献标识码:A 文章编号:1001-3547(2015)24-0041-03

叶绿素是一类和光合作用有关的重要色素,其含量是植物重要的一项生理指标.叶片是植物进行光合作用的场所,其叶绿素含量的高低是光合作用的效率和质量的直接反映,因此叶绿素含量可一定程度上反映植物的生长发育状况.对于大果型的西瓜而言,光合作用是西瓜产量形成的最重要保证.因此,西瓜叶绿素含量对西瓜生产至关重要.

早期被国际上广泛采用的Arnon法提取叶绿素,过程繁琐、工作量大,且叶绿素易受光氧化而导致试验误差[1].陈福明等[2]提出的混合液浸提法,却均由于提取时间较长,提取液稳定性较差,测定值偏低而未被广泛采用.刘绚霞等[3]进行了油菜叶绿素提取方法的研究,结果表明,丙酮∶乙醇为2∶1混合液提取油菜叶绿素效果较好,操作简单、提取完全、误差小、效率高.本试验在前人研究的基础上,在室温条件下,利用不同时间、不同混合液浸提叶绿素,以期筛选出测定西瓜叶片叶绿素所需的最佳时间和最佳提取液,为西瓜田间大量样本叶绿素含量的测定提供参考.

1 材料和方法

1.1 试验材料

供试品种为州职一号,2015年3月24日播种,当幼苗长至4叶1心时,随机抽取瓜苗,取第2~3片真叶,洗净,吸干叶片表面水分,去除叶柄、大叶脉后剪碎混匀.

采用752紫外可见分光光度计测定吸光度,丙酮、95%乙醇、甲醇等试剂均为分析纯,试验用水为蒸馏水.

1.2 试验方法

提取液设5个处理,分别为80%丙酮+20%蒸馏水;50%丙酮+50%乙醇;45%丙酮+45%乙醇+10%蒸馏水; 50%丙酮+50%甲醇;45%丙酮+45%甲醇+10%蒸馏水.每份称取0.2 g,剪碎,在室温下放入具塞试管,10个为一组,室温暗室下分别加入5种混合提取液2 mL浸提叶绿素,并不时摇动,8 h后每隔4 h(即8、12、16、20、24、28 h)每种混合提取液各取出2支试管,定容至20 mL然后在663 nm及645 nm波长下测定吸光度值(以蒸馏水为空白,调整吸光度值至0),根据Lambert-Beer定律,计算鲜样中叶绿素a和叶绿素b的含量[4].

叶绿素a 含量等于 ;叶绿素b 含量等于 ;叶绿素总含量等于 ,其中叶绿素含量:mg/g;提取液总量:mL;样品鲜质量:g.

2 结果和分析

2.1 不同浸提时间、不同浸提液对测定叶绿素含量的影响

从表1可以看出,在室温(23℃)下浸提西瓜叶绿素,不同时间、不同混合液表现出相同的趋势,即50%丙酮+50%乙醇、50%丙酮+50%甲醇的混合液提取效果比同类加蒸馏水的好,提取的叶绿素含量相对较多且时间较短;单一的80%丙酮+20%蒸馏水提取叶绿素最慢且含量最低,这和陈洪国等[5]的研究结果一致,表明混合液提取叶绿素比单一的提取液好,且时间较短.

2.2 不同时间各提取液吸收光谱的比较

从图1可以看出,5种叶绿素提取液的吸收光谱中,50%丙酮+50%乙醇、50%丙酮+50%甲醇的趋势基本一致,所对应的波长663 nm及645 nm的最高值均在16 h出现,其后逐步下降;45%丙酮+45%乙醇+10%蒸馏水、45%丙酮+45%甲醇+10%蒸馏水的趋势也基本一致,但其所对应的波长663 nm及645 nm的最高值均在20 h出现,其后开始下降;80%丙酮+20%蒸馏水对应的波长663 nm及645 nm的最高值均在24 h出现,峰值出现时间最晚,表明此提取液提取叶绿素耗时最长,所提取的叶绿素含量最少,至于具体原因有待进一步研究.

3 讨论和结论

混合液浸提法所得的叶绿素含量明显高于单一的浸提液,且提取时间相对较短,其中以混合液50%丙酮+50%乙醇浸提所得叶绿素的含量最高.试验中,单一的80%丙酮+20%蒸馏水浸提所得叶绿素含量最低,且浸提时间最长.这表明丙酮和乙醇混合提取叶绿素存在协同效应,且等比例等摩尔混合时效果最佳,在波长663 nm及645 nm的最高值出现时间最早.因此,在西瓜田间大量样本叶绿素测定时,可采用50%丙酮+50%乙醇提取.

参考文献

[1] 张志良,瞿伟菁.植物生理学实验指导.2版[M].北京:高等教育出版社,2003,67-70.

[2] 陈福明,陈顺伟.混合液法测定叶绿素含量的研究[J].林业科技通讯,1984(2):4-8.

[3] 刘绚霞,董振生,刘创社,等.油菜叶绿素提取方法研究[J].中国农学通报,2004,20(4):62-63.

[4] 徐芬芬,叶利民,徐卫红,等.小白菜叶绿素含量的测定方法比较[J].北方园艺,2010(23):32-34.

[5] 陈洪国,姜军权.不同浸提温度、时间及浸提剂对测定叶绿素含量的影响[J].咸宁学院学报,2005,25(6):77-78.

结论:适合不知如何写叶绿素方面的相关专业大学硕士和本科毕业论文以及关于叶绿素什么人不能喝论文开题报告范文和相关职称论文写作参考文献资料下载。

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