大白菜种质资源抗根肿病基因CRa和CRb分子标记鉴定和分析,此文是一篇种质资源论文范文,为你的毕业论文写作提供有价值的参考。
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摘 要：大白菜根肿病是一种严重影响大白菜生长的土传病害,已成为大白菜重要病害之一.CRa和CRb是大白菜抗根肿病的两个重要基因.本研究对已发表的4个CRa分子标记进行筛选,选出1对和CRa基因紧密连锁的标记,包括抗病基因标记SC2930-T和感病基因标记SC2930-Q.利用该CRa基因标记和已经验证的CRb基因标记TCR05对24份推广或拟推广大白菜品种进行筛选,选出同时具有CRa和CRb基因的品种12份,只有CRa基因、没有CRb基因的品种5份,只有CRb基因、没有CRa基因的品种3份,CRa和CRb基因均不含有的品种4份,表明CRa和CRb基因均为独立遗传的显性抗性基因.本研究对大白菜抗根肿病分子标记辅助育种具有重要的参考价值.
关键词：大白菜；种质资源；根肿病；CRa和CRb；分子标记
中图分类号：S634.1+Q78文献标识号：A文章编号：1001-4942（2016）12-0016-05
Abstract Clubroot disease is one of the most serious diseases of Chinese cabbage （Brassica rapa） caused by the soil-borne plant pathogen Plasmodiophora brassicae. CRa and CRb are the two important genes against to clubroot disease in Chinese cabbage breeding. In this research, we selected a pair of effective SCAR makers SC2930-T and SC2930-Q to detect CRa gene from four published candidates. Depending on this pair of markers and another effective codominant marker TCR05 closely linked to CRb gene, 12 varieties both with CRa and CRb genes, 5 varieties only with CRa gene, 3 varieties only with CRb gene and 4 varieties with neither CRa nor CRb genes were screened out from 24 important Chinese cabbage varieties. This research results showed that both CRa and CRb were independent dominant genes resistant to clubroot disease in Chinese cabbage. This research had great reference values for molecular marker assisted breeding of Chinese cabbage resistant to clubroot disease.
Keywords Chinese cabbage； Germplasm resources； Clubroot disease； CRa and CRb； Molecular markers
大白菜根肿病是由芸薹根肿菌（Plasmodiophora brassicae Woron.）侵染引起的土传性病害,严重危害十字花科蔬菜的生产.在我国云南、四川、山东等地,大白菜根肿病发生面积已经超过种植面积的65%,部分田块的损失超过50%,严重制约大白菜的生产[1].实践证明,培育抗根肿病品种是防治大白菜根肿病的重要措施.迄今为止,在亚洲芸薹种中尚未鉴定出十字花科根肿病抗性种质,大白菜根肿病抗源均来源于地中海43份CR芜菁品系,表现出高抗甚至免疫[2].目前在大白菜上已经鉴定出8个和抗根肿病有关的基因位点,包括位于A03染色体上的CRa、CRb、CRk和Crr3,以及分别位于A08、A01、A06、A02染色体上的Crr1、Crr2、Crr4和CRC[3-7].CRa、CRb是两个重要的抗根肿病基因,但目前国内利用分子标记对大白菜种质资源中这两个基因进行鉴定的研究报道不多,限制其育种进程.本研究对国外已发表的4个CRa标记进行筛选,并利用筛选出的CRa标记和我们已经验证的CRb标记对来源于国内外的24份重要大白菜种质资源进行鉴定,并对CRa和CRb两个基因的连锁关系进行分析,以期为大白菜抗根肿病育种提供高质量的抗性种质资源和准确便捷的辅助鉴定方法.
1 材料和方法
1.1 试验材料
供试大白菜品种共24个（表1）,其中1号为对照,是青岛地区主栽品种87-114,其余均为国内外公司最近几年已经推广或正在测试的抗根肿病品种.
1.2 试验方法
1.2.1 DNA提取及PCR扩增条件 取5叶1心期幼嫩的大白菜内叶为试材,DNA提取方法参照Williamson等[8]的CTAB法.
PCR反应总体积为20 μL：在48孔PCR板中分别加入PCR Master Mix （2×） 10 μL,上游引物和下游引物（10 U/μL）各1 μL,50 ng/μL模板DNA 2 μL,ddH2O补齐至20 μL.
PCR的反应程序：94℃预变性3 min；94℃变性1 min,55℃退火1.5 min,72℃延伸1.5min,35个循环；72℃重延伸10 min,4℃保存.
PCR产物于1.5%琼脂糖凝胶、电压5 V/cm条件下电泳1 h,用Goodview染色,Bio-RAD凝胶成像系统成像,观察并保留结果.
结论：关于种质资源方面的论文题目、论文提纲、种质资源库包括论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。
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